血磷主要指血中的無機磷,以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關系密切,在以mg/dL表示時,二者的乘積([Ca]×[P])為30~40。當([Ca]×[P])>40,則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織;若([Ca]×[P])<35則妨礙骨的鈣化,甚至可使骨鹽溶解,影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對穩定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到維生素D3、甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調節。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測血清樣本中磷的含量。其原理是去除血清中有機磷后,無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,被硫酸亞鐵還原后呈藍色,在660nm有光吸收;通過測定660nm吸光度,計算血液中磷含量。
酶標儀或可見分光光度計(能測660nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
離心機
去離子水
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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