谷丙轉氨酶又叫丙氨酸氨基轉移酶(EC 2.6.1.2),GPT廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化氨基酸和酮酸轉氨基反應,在氨基酸代謝中具有重要作用。哺乳動物肝細胞GPT活性很高,當肝細胞壞死,GPT釋放到血液中,血清GPT活性顯著增高。因此,GPT被世界衛生組織推薦為肝功能損害敏感的檢測指標。
此外,GPT在心肌細胞中含量高,臨床上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本中GPT的活性水平。其原理是GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發生轉氨基反應,生成丙酮酸和谷氨酸;加入2,4-二硝基苯肼溶液,不僅終止上述反應,而且與酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在堿性條件下呈紅棕色,可以在505nm讀取吸光值并計算GPT酶活力。
酶標儀或可見分光光度計(能測505nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠凝的不均勻或聚合不好,建議灌膠前將溶液充分混勻;
2、某些樣品鹽濃度較高,建議除鹽或將樣品鹽濃度調成一致;
3、緩沖液陳舊,成分改變,可以重配;
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走;
5、電泳時溫度過高,可以降低電流或電壓;
6、樣品中含有不溶性顆粒,建議樣品充分攪拌混勻。
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