脯氨酸(PRO)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，逆境條件下，植物體內(nèi)PRO含量顯著增加。PRO增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性強的品種往往積累較多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標之一。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測各種生物樣本中PRO含量。其原理是用磺基水楊酸（SA）提取脯氨酸(PRO)，加熱處理后，脯氨酸(PRO)與酸性茚三酮溶液反應生成紅色；加甲苯萃取后，在520nm測定吸光度。
酶標儀或可見分光光度計（能測520nm處的吸光度）及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
離心機、制冰機
去離子水、甲苯
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液體積和洗滌次數(shù)；
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜，可以調(diào)整電極和加樣；
4、封閉物用量不足，可以提高封閉物濃度，孵育時保證封閉液完全浸沒轉(zhuǎn)印膜；
5、封閉物使用不當，比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉；
6、封閉時間不夠，一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜；
7、抗體非特異性結(jié)合，可以降低抗體濃度，減少孵育時間；
8、一抗稀釋度不適宜，可以對抗體進行滴度測試，選擇適宜的抗體稀釋度；
9、一抗孵育的溫度偏高，建議4℃結(jié)合過夜；
10、抗體濃度過高或洗滌不夠，建議降低抗體濃度，增加洗滌次數(shù)和時間；
11、化學顯色底物過多，建議按說明書加入適量的顯色底物。
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