ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。本試劑盒提供了一種簡單、快速的ACP檢測方法,其檢測原理是在酸性環(huán)境中,ACP催化對硝基苯磷酸二鈉水解生成4-硝基苯酚,在405nm有特征光吸收;通過測定405nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(能測405nm處的吸光度)
恒溫箱、制冰機、低溫離心機
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調(diào)整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關(guān)文獻確定;
5、標(biāo)本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設(shè)置陽性對照比對結(jié)果,增加標(biāo)本上樣量。
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