乙酰輔酶A羧化酶(Acetyl-CoA carboxylase,ACC)在生物體內催化乙酰輔酶A羧化生成丙二酰輔酶A,是脂肪酸和許多次生代謝產物合成的關鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
ACC廣泛存在于生物界,在許多所知的乙酰輔酶A羧化酶中,對大腸桿菌中的酶了解得清楚。本試劑盒可檢測生物體內ACC活性,其原理是ACC能夠催化乙酰輔酶A、NaHCO3和ATP生成丙二酰輔酶A、ATP和無機磷,通過鉬酸銨定磷法測定無機磷的增加量來計算ACC活性。
酶標儀或可見分光光度計(能測660nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
1. 實驗過程中請穿戴實驗服、口罩和乳膠手套。請按照生物實驗室的國家安全規定進行實驗,尤其是在檢測血樣或其他體液時。
2. 本試劑盒僅用于實驗室科學研究,如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途,我們將不對任何后果負責。
3. 本試劑盒應在有效期內使用,并請嚴格按照說明書進行存儲。
4. 不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用;否則,可能導致結果異常。
5. 勤換吸頭,避免各組分之間的交叉污染。
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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