6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的步反應中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。本試劑盒提供了一種簡單易用的方法,用于測量各種生物樣本中6PG含量。原理是6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450nm 處有大吸收峰,據此可計算6PG含量。
酶標儀或可見分光光度計(能測 450nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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