硝酸還原酶(NR,EC 1.7.1.3)是一種氧化還原酶,可催化硝酸離子還原成亞硝酸離子的反應(yīng)。廣泛存在于高等植物、藻類(lèi)、真菌及細(xì)菌中,是植物硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮的關(guān)鍵酶,也是誘導(dǎo)酶,對(duì)作物的產(chǎn)量和品質(zhì)有影響。硝酸還原酶位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)或細(xì)胞膜外,在硝酸鹽還原途徑中是限速因子,使硝酸鹽轉(zhuǎn)換成亞硝酸鹽。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單的比色法來(lái)檢測(cè)生物樣本中硝酸還原酶活性。其原理是NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,伴隨NADH氧化生成NAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,而NAD+沒(méi)有,通過(guò)測(cè)定340nm光吸收下降速率,即可反映NR活性。
酶標(biāo)儀或可見(jiàn)光分光光度計(jì)(能測(cè) 340nm處的吸光值)及恒溫培養(yǎng)箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠凝的不均勻或聚合不好,建議灌膠前將溶液充分混勻;
2、某些樣品鹽濃度較高,建議除鹽或?qū)悠符}濃度調(diào)成一致;
3、緩沖液陳舊,成分改變,可以重配;
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走;
5、電泳時(shí)溫度過(guò)高,可以降低電流或電壓;
6、樣品中含有不溶性顆粒,建議樣品充分?jǐn)嚢杌靹颉?/p>
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