植酸酶(Phytase)又叫肌醇六磷酸酶,是一種蛋白質和糖的結合酶,是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與無機磷的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶。植酸酶能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷,極大的提高生物對養分的利用率,降低糞便中的磷含量,減輕對環境的污染,改善營養成分的吸收和利用。天然植酸酶廣泛存在于植物、動物組織和微生物中,現多用微生物來合成植酸酶進行生產應用,植酸酶在糧食生產、畜牧養殖領域具有廣泛的研究價值。 本試劑盒提供了一種簡便的比色測定法,用于測定樣本中的植酸酶活性。其原理是植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物,無機磷在酸性環境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物,在700nm處有特征吸收峰,根據700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。
酶標儀或分光光度計(能測700nm處的吸光度)及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
40目篩(如果是飼料樣本)
更新中...
答:可能的原因有:
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜;
2、洗膜不充分,可以增加洗液體積和洗滌次數;
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜,可以調整電極和加樣;
4、封閉物用量不足,可以提高封閉物濃度,孵育時保證封閉液完全浸沒轉印膜;
5、封閉物使用不當,比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉;
6、封閉時間不夠,一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜;
7、抗體非特異性結合,可以降低抗體濃度,減少孵育時間;
8、一抗稀釋度不適宜,可以對抗體進行滴度測試,選擇適宜的抗體稀釋度;
9、一抗孵育的溫度偏高,建議4℃結合過夜;
10、抗體濃度過高或洗滌不夠,建議降低抗體濃度,增加洗滌次數和時間;
11、化學顯色底物過多,建議按說明書加入適量的顯色底物。
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