葡萄糖-6-磷酸酶(glucose 6 phosphatase,G6Pase,EC 3.1.3.9)是一種水解磷酸化合物的磷酸酶,廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和細(xì)胞中,是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證血糖的動(dòng)態(tài)平衡方面起著重要的作用。本試劑盒提供了一種簡單的檢測(cè)方法,用于檢測(cè)生物樣本中G6P的活性。其原理是G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,變旋酶和葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NAD+還原生成NADH,在340nm下測(cè)定NADH生成速率,即可反映G6P活性。
酶標(biāo)儀或紫外分光光度計(jì)(能測(cè)340nm處的吸光度)及恒溫箱
96孔UV板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
低溫離心機(jī)、制冰機(jī)
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:如果能夠排除下面的幾個(gè)問題,那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強(qiáng),將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應(yīng)位置;
4、一抗選擇不當(dāng);
5、二抗失活。
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