S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,是土壤硝態(tài)氮還原的關(guān)鍵酶。研究S-NR的活性對(duì)合理施肥,降低氮 素的損失具有重要意義。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單的比色法來檢測(cè)土壤硝酸還原酶(S-NR)。其原理是 S-NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ+NADH+H+→ NO2ˉ+NAD++H2O;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,與對(duì)–氨基苯磺酸及α- 萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在540nm有大吸收峰,測(cè)定540nm處的吸光值的增加,可以反映S-NR活性。
酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(jì)(能測(cè)540nm處的吸光值)、烘箱、水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
臺(tái)式離心機(jī)、30-50目篩
去離子水
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答:如果能夠排除下面的幾個(gè)問題,那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強(qiáng),將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應(yīng)位置;
4、一抗選擇不當(dāng);
5、二抗失活。
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