本預制膠Tris-Gly是一款安全、快捷、高性能的預制聚丙烯酰胺凝膠,常用于PAGE和Western blot檢測。 采用自動化的灌膠生產技術,確保了產品質量的高穩定性和重復性。采用鍍膜塑料膠板,有效減少蛋白非特異 性吸附,使蛋白條帶更為敏銳,清晰。電泳時間短,使用Western快速電泳緩沖液(PMK0563L),在 200V電壓 下,電泳25min即可完成。膠夾打開極為輕松,塑料板可以用螺絲刀撬開。凝膠中不含 SDS, 可用于變性和非變 性電泳。兼容市場上主流的mini電泳槽,如Bio-Rad, 天能和君意東方等。提供多種濃度的均一膠和梯度膠。均 一膠可選濃度:10%,12%,15%。梯度膠可選濃度:4-15%,4-20%,8-16%,8-20%。也可以提供特殊濃度 的定制服務。
預制膠本身都不含 SDS,可根據電泳緩沖液的不同用于變性電泳和非變性電泳
可以兼容大部分的 mini SDS-PAGE 電泳槽 a.Bio-Rad Mini-PROTEAN (II/3 /Tetra System); b.Hoefer Mighty Small (SE 250/ SE 260/ SE 280); c.Life Technology Novex Mini-Cell; d.Life Mini Gel Tank 小型膠電泳槽; e.北京六一 DYCZ-25E、DYCZ-24K、DYCZ-24KS、DYCZ-24KF; f.君意東方 JY-SCZ2+; g.天能 VE180; 或其它膠板寬度在 10 厘米的電泳槽。
1.Tris-Gly預制膠使用的是中性的Tris-Gly緩沖系統。
2.使用本公司的Western快速電泳緩沖液(PMK0563L),200V僅需25min即可完成電泳。
3.如果需要蛋白條帶更加清晰、平直,可降低電壓至150V,適當延長電泳時間。
4.電泳緩沖液不建議重復使用。因為經過電泳之后,緩沖液中的離子強度、緩沖能力都發生了變化,不能確保電 泳效果。
5.如需分離<10 kDa 的蛋白,建議使用Tricine體系預制膠。
6.如需分離>300 kDa 的蛋白,建議使用Tris-Acetate體系預制膠。
7.僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
8.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
答:可能的原因有:
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜;
2、洗膜不充分,可以增加洗液體積和洗滌次數;
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜,可以調整電極和加樣;
4、封閉物用量不足,可以提高封閉物濃度,孵育時保證封閉液完全浸沒轉印膜;
5、封閉物使用不當,比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉;
6、封閉時間不夠,一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜;
7、抗體非特異性結合,可以降低抗體濃度,減少孵育時間;
8、一抗稀釋度不適宜,可以對抗體進行滴度測試,選擇適宜的抗體稀釋度;
9、一抗孵育的溫度偏高,建議4℃結合過夜;
10、抗體濃度過高或洗滌不夠,建議降低抗體濃度,增加洗滌次數和時間;
11、化學顯色底物過多,建議按說明書加入適量的顯色底物。
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