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Western Blot(WB)實驗中膠片是一片空白,是怎么回事?
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
First-Strand cDNA Synthesis Kit是從TotalRNA或Poly(A)*RNA合成鏈cDNA的試劑盒。試劑盒中的HyperScript ReverseTranscriptase是在M-MLV(RNaseH)Reverse Transcriptase基礎上經過基因工程改造后獲得的全新逆轉錄酶,相較而言HyperScript ReverseTranscriptase降低了RNaseH活性且大幅度提高了熱穩定性。HyperScript ReverseTranscriptase可耐受更高的反應溫度,適用于具有復雜二級結構的RNA模板的逆轉錄。此外,HyperScript ReverseTranscriptase增強了與模板的親和力,話合少量模板以及低拷貝基因的道轉錄,可合成長達12.3kb的鏈cDNA 。
First-StrandcDNA Synthesis Kit包含合成鏈cDNA所需的所有組分,并提供Random Primers Oligo (dT) 23VN兩種cDNA合成引物??筛鶕嶒炐枰x擇RandomPrimersOligo(dT)23VN或基因特異性引物作為逆轉錄引物,合成的鏈cDNA產物可用于后續的PCR擴增、qPCR反應等實驗。
更新中...
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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