Hoechst染料是一類在顯微觀察中標記DNA的熒光染料。因為這類熒光染料能標記DNA,所以它們也經常用于細胞核和線粒體的顯像觀察。這類染料中兩個相關的染料Hoechst 33258和Hoechst 33342經常使用。這兩種染料都在紫外光下350nm處被激發,都在461nm處大發射光附近發射藍/青色熒光。Hoechst染料可以用于活細胞或者固定化細胞,并且經常用來代替其它核酸染料如DAPI。這兩種染料關鍵的不同點在于,Hoechst 33342加有乙基,這使它具有更強的親脂性,因此能更好的透過完整的細胞膜。在一些實驗中,Hoechst 33258的滲透性明顯比Hoechst 33342要弱些。這些染料也可以用來檢測樣品中的DNA含量,通過繪制發射光強度與DNA含量的標準曲線。
Hoechst 33258是一種可透過細胞膜并對DNA染色的細胞核染色試劑,它在嵌入雙鏈DNA后釋放強烈的藍色熒光。Hoechst 33258常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258-DNA的激發和發射波長分別為350 nm和460 nm。
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答:可能是由于培養條件不適、基因突變、藥物作用等原因引起的。
解決方法:
1、優化培養條件,如調整溫度、pH值、氣體比例等;
2、觀察細胞形態和生長情況,及時發現凋亡跡象;
3、對于凋亡嚴重的細胞株,可以嘗試進行基因檢測和藥物篩選,以找到引起凋亡的原因。
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