異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷簡稱IPTG，分子式為C9H18O5S，分子量為238.30CAS號為367-93-1。IPTG是一種作用極強的誘導劑，不易被細菌代謝而且很穩定。基于這個特性，當攜帶帶lacZ 基因載體DNA以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時，如果在平板培養基中加入X–gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互補性，可根據是否呈現藍/白色菌落(或噬菌斑)判斷出基因重組體。此外，它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。IPTG溶液(50mg/ml)經過濾除菌，一般工作濃度為1mM，主要用于誘導外源基因的表達，也用于原核表達系統，使其表達量增高，產物穩定，且易鑒定、易純化。IPTG經常與X-Gal合用，X-Gal的工作濃度一般在5～10μg/ml。
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答：可能的原因有：
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液體積和洗滌次數；
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜，可以調整電極和加樣；
4、封閉物用量不足，可以提高封閉物濃度，孵育時保證封閉液完全浸沒轉印膜；
5、封閉物使用不當，比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉；
6、封閉時間不夠，一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜；
7、抗體非特異性結合，可以降低抗體濃度，減少孵育時間；
8、一抗稀釋度不適宜，可以對抗體進行滴度測試，選擇適宜的抗體稀釋度；
9、一抗孵育的溫度偏高，建議4℃結合過夜；
10、抗體濃度過高或洗滌不夠，建議降低抗體濃度，增加洗滌次數和時間；
11、化學顯色底物過多，建議按說明書加入適量的顯色底物。
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