Super Green(可替代Sybr Green)新型核酸染料是一種油性大分子,不易揮發升華,不易穿透完整細胞膜進入活體細胞內,實驗顯示在凝膠染色濃度下沒有發現誘變性,具有使用相對安全、檢測靈敏等特點,可以作為各種核酸電泳的染色劑,適用于各種片段大小染色。與標準凝膠成像系統和可見光激發的凝膠觀察裝置完美兼容,適用于紫外凝膠成像系統或藍色可見光激發的凝膠觀察裝置。
相對安全:油性大分子特點使其不易穿透完整細胞膜進入細胞內,使用相對安全,實驗顯示在工作濃度(凝膠染色 濃度)下沒有發現誘變性,可以代替致癌物溴化乙錠EB作為各種核酸電泳的染色劑。
靈敏度高:適用于各種大小片段的電泳染色,對核酸遷移的影響較小。
穩定性高:適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩定,耐光性強。
信噪比高:樣品熒光信號強,背景信號低。
操作簡單:在預制膠和電泳過程中不降解,可直接用可見光凝膠透射儀觀察。
適用范圍:可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可 用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
儀器兼容:適用于使用254nm 激發的紫外凝膠成像系統或藍色可見光激發的凝膠觀察裝置。它和SYBR Green I的 光譜相似,靈敏度相當,但更加穩定。
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答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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