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IHC實(shí)驗(yàn)中高背景
1、沒有對非特異性結(jié)合進(jìn)行封閉或封閉不充分;
2、一抗?jié)舛瓤赡苓^高;
3、孵育溫度可能過高;
4、二抗可能存在非特異性結(jié)合;
5、組織洗滌不充分;仍然存在固定劑;
6、內(nèi)源性過氧化物酶具有活性;
7、固定步驟導(dǎo)致自發(fā)熒光(如果使用熒光檢測);
8、組織內(nèi)自發(fā)熒光(如果使用熒光檢測);
9、信號放大過多(間接檢測技術(shù));
10、底物過多(酶檢測);
11、色原與組織樣品中存在的PBS反應(yīng)(酶檢測)。