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Hela細(xì)胞是個(gè)來自人組織和連續(xù)培養(yǎng)維持非整倍體上皮樣細(xì)胞系。Hela 細(xì)胞是由G·D·Gey等在1951年從31歲女性黑人的宮頸癌建立。經(jīng)原始組織切片 樣品的重新觀察，Jones等將其診斷為腺癌。已知該細(xì)胞系含有人乳頭狀瘤病毒 18序列，需在2級(jí)生物安全防護(hù)臺(tái)操作。Hela細(xì)胞角蛋白陽性，p53表達(dá)量較低， 但表達(dá)正常水平的Prb(視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制因子)。

1） 來源: 宮頸腺癌

2） 形態(tài): 上皮細(xì)胞樣，多角形，貼壁生長

3）含量:  >1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格:  T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝

5）用途:  僅供科研使用。

（1）1mL 凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收 到后-80 度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存 管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25 瓶復(fù)蘇的存活 細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。 

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況，若細(xì)胞密度在70%-80%左右，可進(jìn)行傳代，首次傳代建議1:2(也可根據(jù)情況調(diào)整)，若細(xì)胞生長不足70%，建議消化處理后，轉(zhuǎn)移到新的T25培養(yǎng)瓶（1：1）繼續(xù)培養(yǎng)。

4）半貼細(xì)胞或貼壁不牢（懸浮）細(xì)胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況，若細(xì)胞密度在60%以下，客戶需收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用完全培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，若細(xì)胞生長70%-90%對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代，傳代時(shí)需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收。

5）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌注培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。

1）準(zhǔn)備培養(yǎng)基：MEM（含NEAA）培養(yǎng)基；10%胎牛血清；1%雙抗

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5% 。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱 濕度為 70%-80%。

3）凍存液：55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基，40%FBS，5%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配