研究細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和定位,需要用到對(duì)活細(xì)胞無(wú)毒的專一性探針。活細(xì)胞示蹤試劑盒提供了一種通用且保存良好的細(xì)胞示蹤試劑(活細(xì)胞熒光示蹤探針),用于監(jiān)測(cè)細(xì)胞的移動(dòng),位置,增殖,遷移,趨化性和侵襲性。活細(xì)胞熒光示蹤探針,可以通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞,與細(xì)胞內(nèi)蛋白共價(jià)結(jié)合,是一種長(zhǎng)效細(xì)胞示蹤染料。一旦進(jìn)入細(xì)胞,非熒光性的活細(xì)胞熒光示蹤探針會(huì)被胞內(nèi)酯酶水解,產(chǎn)生綠色熒光(Ex/Em=494/521nm)。這些熒光產(chǎn)物只能積聚在具有完整細(xì)胞膜的細(xì)胞中,因此死細(xì)胞因無(wú)完整細(xì)胞膜不能被染色。活細(xì)胞熒光示蹤探針對(duì)pH變化不敏感,可以由甲醛或戊二醛固定。活細(xì)胞熒光示蹤探針可以在活細(xì)胞中保留好幾代,并可以顯示熒光至少一周。探針可被轉(zhuǎn)移到子細(xì)胞,但是不轉(zhuǎn)移到群體中的相鄰細(xì)胞。
熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀、離心機(jī)
24孔板、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水、PBS
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答:可能的原因包括培養(yǎng)基質(zhì)量、血清質(zhì)量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清,確保其無(wú)菌、無(wú)支原體污染,并保證在保質(zhì)期內(nèi)使用;
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定,定期校準(zhǔn);
3. 每天檢查并記錄細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù),如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問(wèn)題;
4. 定期更換培養(yǎng)基,保持細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)充足;
5. 對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞株,可以嘗試進(jìn)行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
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