TBS緩沖液中文名為Tris緩沖鹽溶液、Tris鹽緩沖液、TBS緩沖液,是生物學(xué)中常用的緩沖液,廣泛用于Western、免疫組化、免疫沉淀、免疫共沉淀、ELISA等實驗中洗滌緩沖液或封閉液等的配制。TBS由Tris-HCl構(gòu)成穩(wěn)定的pH緩沖體系,由NaCl提供等滲條件。
TBS緩沖液(10×,pH7.4)中含200mM Tris、1.37M NaCl,pH7.4±0.1(25℃)。TBS緩沖液(10×,pH7.4)是10倍濃縮液,使用時須用蒸餾水或去離子水溶解配制成1X后使用。例如配制1L TBS(1X),取100ml TBS緩沖液(10×,pH7.4)加入900ml去離子水混勻即可。
根據(jù)實際需要參閱相關(guān)文獻配制和使用。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調(diào)整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關(guān)文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設(shè)置陽性對照比對結(jié)果,增加標本上樣量。
答:可能的原因有:
1、膠凝的不均勻或聚合不好,建議灌膠前將溶液充分混勻;
2、某些樣品鹽濃度較高,建議除鹽或?qū)悠符}濃度調(diào)成一致;
3、緩沖液陳舊,成分改變,可以重配;
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走;
5、電泳時溫度過高,可以降低電流或電壓;
6、樣品中含有不溶性顆粒,建議樣品充分攪拌混勻。
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