答：可能的原因有：

1、IHC實(shí)驗(yàn)一抗和二抗不兼容；

2、沒有足夠的一抗與目的蛋白結(jié)合；

3、抗體可能不適用于IHC，因?yàn)槠淇赡軣o法識(shí)別蛋白的天然(3D)形式；

4、一抗/二抗/信號(hào)放大試劑盒可能因儲(chǔ)存不當(dāng)、稀釋不當(dāng)或多次反復(fù)凍融而失去活性；

5、該蛋白不存在于目標(biāo)組織中；

6、目的蛋白在組織中含量并不豐富；

7、二抗未避光保存（進(jìn)行熒光檢測(cè)時(shí)）；

8、脫蠟可能不充分；

9、固定步驟可能會(huì)改變抗體識(shí)別的抗原表位；

10、抗體不能穿透蛋白所定位的細(xì)胞核（核蛋白）；

11、PBS緩沖液被細(xì)菌污染，細(xì)菌會(huì)破壞目的蛋白上的磷酸基團(tuán)（磷酸化蛋白）；

12、抗原修復(fù)不全，對(duì)于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位，以利于與抗體結(jié)合。

1、一抗/二抗?jié)舛瓤赡苓^高；

2、內(nèi)源性過氧化物酶具有活性；

3、使用與染色組織相同種屬來源的一抗（例如在小鼠組織上使用小鼠一抗）。應(yīng)用二抗時(shí)，由于二抗是靶向組織種屬的，與組織中的免疫球蛋白或蛋白的Fc片段結(jié)合；

4、切片/細(xì)胞已干燥；

5、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色；

6、非特異性組分與抗體結(jié)合。

1、抗原修復(fù)方法可能過于苛刻；

2、組織可能未充分固定；

3、組織切片從載玻片上脫落（冰凍切片）；

4、組織切片撕裂或折疊，或切片下方可見氣泡；

5、組織形態(tài)難以分辨；

6、組織自溶。

1、沒有對(duì)非特異性結(jié)合進(jìn)行封閉或封閉不充分；

2、一抗?jié)舛瓤赡苓^高；

3、孵育溫度可能過高；

4、二抗可能存在非特異性結(jié)合；

5、組織洗滌不充分；仍然存在固定劑；

6、內(nèi)源性過氧化物酶具有活性；

7、固定步驟導(dǎo)致自發(fā)熒光（如果使用熒光檢測(cè)）；

8、組織內(nèi)自發(fā)熒光（如果使用熒光檢測(cè)）；

9、信號(hào)放大過多（間接檢測(cè)技術(shù)）；

10、底物過多（酶檢測(cè)）；

11、色原與組織樣品中存在的PBS反應(yīng)（酶檢測(cè)）。

答：可能的原因包括培養(yǎng)基質(zhì)量、血清質(zhì)量、溫度、pH值、氣體比例等。

解決方法有：
1. 使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清，確保其無菌、無支原體污染，并保證在保質(zhì)期內(nèi)使用；
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定，定期校準(zhǔn)；
3. 每天檢查并記錄細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù)，如溫度、pH值、氣體比例等，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題；
4. 定期更換培養(yǎng)基，保持細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)充足；
5. 對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞株，可以嘗試進(jìn)行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。

答：細(xì)胞形態(tài)異常可能是由于支原體污染、有毒物質(zhì)釋放、營(yíng)養(yǎng)不足等原因引起的。
解決方法有：
1、定期進(jìn)行支原體檢測(cè)，確保細(xì)胞無支原體污染；
2、檢查培養(yǎng)基和血清的質(zhì)量，避免使用過期或劣質(zhì)的試劑；
3、觀察細(xì)胞形態(tài)，發(fā)現(xiàn)異常及時(shí)采取措施，如更換培養(yǎng)基或使用相應(yīng)的藥物處理；
4、對(duì)于有毒物質(zhì)釋放引起的形態(tài)異常，可以嘗試降低細(xì)胞密度或更換培養(yǎng)基。

答：可能是由于培養(yǎng)條件不適、基因突變、藥物作用等原因引起的。
解決方法：
1、優(yōu)化培養(yǎng)條件，如調(diào)整溫度、pH值、氣體比例等；
2、觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)情況，及時(shí)發(fā)現(xiàn)凋亡跡象；
3、對(duì)于凋亡嚴(yán)重的細(xì)胞株，可以嘗試進(jìn)行基因檢測(cè)和藥物篩選，以找到引起凋亡的原因。

可能原因                         解決措施是
1，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確。  確保標(biāo)準(zhǔn)品按照推薦方法溶解和稀釋。
2，移液不準(zhǔn)確。            定期校準(zhǔn)移液器并檢查槍頭密封性。
3，反應(yīng)液蒸發(fā)。            用封板膜密封酶標(biāo)板。
4，洗板不徹底。            足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5，孔底有異物。            讀數(shù)前清潔板底。

可能原因                         解決措施是
1，試劑反應(yīng)不充分         確保孵育時(shí)間并按推薦溫度孵育
2，試劑體積添加不足      檢查移液器并嚴(yán)格按照操作步驟操作
3，稀釋不正確                檢查試劑稀釋步驟
4，酶結(jié)合物失活             混合酶結(jié)合物和底物，通過顯色反應(yīng)檢查

      可能原因                         解決措施是
1，酶標(biāo)儀設(shè)置不正確            檢查儀器波長(zhǎng)
2，沒加終止液                      加入適量終止液
3，讀板時(shí)等待時(shí)間太長(zhǎng)        及時(shí)讀板