PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名為苯甲基磺酰氟。分子式為C7H7FO2S,分子量為174.19,純度>99%。
PMSF為常用生化試劑,采用進口試劑配制,用于抑制絲氨酸蛋白酶,如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,同時也可抑制半胱氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶,其有效濃度為0.1~1mM。
使用前PMSF充分溶解混勻,根據溶液的量加入PMSF,使其終濃度達到1mM。
1、本產品對人體有毒,操作時請特別小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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