檢測范圍：0.31-20ng/mL 靈敏度：0.19 ng/mL
精密度：板內(nèi)變異系數(shù)<10%，板間變異系數(shù)<10%
回收率：范圍從 90%到 105%，平均回收率 97%
特異性：檢測具有高靈敏度和優(yōu)良的特異性。未觀察到和人脂質(zhì)運載蛋白2(NGAL)類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾。
適用樣本：血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清和其他生物體液
該試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法原理。酶標(biāo)板預(yù)包被親和純化的抗人 NGAL的抗體。將含有人 NGAL 的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入到酶標(biāo)板中，與包被抗體反應(yīng)。再加入生物素標(biāo)記的檢測抗體，并與酶標(biāo)板上捕獲的人 NGAL結(jié)合。接著，加入鏈霉親和素-辣根過氧化物酶（SA-HRP）以形成固相抗體-人 NGAL-生物素標(biāo)記抗體-SA-HRP的夾心復(fù)合物。然后，將TMB溶液加入孔中并進行孵育，酶促反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，加入終止液后，變成黃色。在450nm 波長下測定吸光值。后通過建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)OD值來計算樣品中人 NGAL的濃度。
未拆封的試劑盒可在 2-8 ℃保存 6 個月；如果開封使用后，請按照下表中的條件分別保存各組分。
1. 實驗過程中請穿戴實驗服、口罩和乳膠手套。請按照生物實驗室的國家安全規(guī)定進行實驗，尤其是在檢測血樣或其他體液時。終止液有一定的腐蝕性，操作時請做好防護措施。
2. 本試劑盒僅用于實驗室科學(xué)研究，如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途，我們將不對任何后果負(fù)責(zé)。
3. 本試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，并請嚴(yán)格按照說明書進行存儲。收到試劑盒后，未開封的試劑盒可在2-8℃下保存1個月。如果試劑盒在1個月內(nèi)不使用，請在收到試劑盒后，將每個組件分別存放在上表中指示的溫度下。
4. 新打開的ELISA酶標(biāo)板可能含有水霧樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果產(chǎn)生任何影響。未用完的板條應(yīng)立即放回裝有干燥劑的鋁箔袋中，重新密封并在-20℃下存儲。
5. 不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用；否則，可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
6. 勤換吸頭，避免各組分之間的交叉污染。
7. 溶解含有蛋白質(zhì)溶液時，應(yīng)始終避免起泡。
8. 不得重復(fù)使用稀釋后的工作液。
9. 為了得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果，在孵育過程中，必須確保封板膜將酶標(biāo)板密封。
10. 在使用自動洗板機時，添加清洗緩沖液后，在清洗步驟之間添加30秒的浸泡時間可提高分析精度。
11. 底物溶液保存過程中應(yīng)為無色，加入到酶標(biāo)板中之后底物溶液應(yīng)從無色變?yōu)闈u變藍(lán)色。
12. 終止液應(yīng)按照與加底物溶液(TMB)相同的順序添加到酶標(biāo)板中。添加終止液后，孔中溶液的顏色將從藍(lán)色變?yōu)辄S色。綠色的孔表明終止液未與底物溶液充分混合，應(yīng)輕拍孔板使其混勻。
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可能原因 解決措施是
1，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確。 確保標(biāo)準(zhǔn)品按照推薦方法溶解和稀釋。
2，移液不準(zhǔn)確。 定期校準(zhǔn)移液器并檢查槍頭密封性。
3，反應(yīng)液蒸發(fā)。 用封板膜密封酶標(biāo)板。
4，洗板不徹底。 足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5，孔底有異物。 讀數(shù)前清潔板底。
可能原因 解決措施是
1，試劑反應(yīng)不充分 確保孵育時間并按推薦溫度孵育
2，試劑體積添加不足 檢查移液器并嚴(yán)格按照操作步驟操作
3，稀釋不正確 檢查試劑稀釋步驟
4，酶結(jié)合物失活 混合酶結(jié)合物和底物，通過顯色反應(yīng)檢查
可能原因 解決措施是
1，酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 檢查儀器波長
2，沒加終止液 加入適量終止液
3，讀板時等待時間太長 及時讀板
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