檢測范圍:15.63-1000pg/mLL 靈敏度:9.38 pg/mL
精密度:板內(nèi)變異系數(shù)<10%,板間變異系數(shù)<10%
回收率:范圍從 85%到 97%,平均回收率 91%
特異性:檢測具有高靈敏度和優(yōu)良的特異性。未觀察到和小鼠脂聯(lián)素(ADPN)類似物之間的顯著交叉反應(yīng)或干擾
適用樣本:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清和其他生物體液
該試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法原理。酶標(biāo)板預(yù)包被親和純化的抗小鼠ADP/Acrp30的抗體。將含有小鼠ADP/Acrp30 的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入到酶標(biāo)板中,與包被抗體反應(yīng)。再加入生物素標(biāo)記的檢測抗體,并與酶標(biāo)板上捕獲的小鼠ADP/Acrp30結(jié)合。接著,加入鏈霉親和素-辣根過氧化物酶(SA-HRP)以形成固相抗體-小鼠ADP/Acrp30-生物素標(biāo)記抗體-SA-HRP的夾心復(fù)合物。然后,將TMB溶液加入孔中并進(jìn)行孵育,酶促反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后,變成黃色。在450nm 波長下測定吸光值。后通過建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)OD值來計(jì)算樣品中小鼠ADP/Acrp30的濃度。
未拆封的試劑盒可在 2-8 ℃保存 6 個(gè)月;如果開封使用后,請按照下表中的條件分別保存各組分。
酶標(biāo)儀(能測450nm處的吸光度)
多通道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)
恒溫箱、低溫離心機(jī)
可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
1. 實(shí)驗(yàn)過程中請穿戴實(shí)驗(yàn)服、口罩和乳膠手套。請按照生物實(shí)驗(yàn)室的國家安全規(guī)定進(jìn)行實(shí)驗(yàn),尤其是在檢測血樣或其他體液時(shí)。終止液有一定的腐蝕性,操作時(shí)請做好防護(hù)措施。
2. 本試劑盒僅用于實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究,如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途,我們將不對任何后果負(fù)責(zé)。
3. 本試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,并請嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行存儲(chǔ)。收到試劑盒后,未開封的試劑盒可在2-8℃下保存1個(gè)月。如果試劑盒在1個(gè)月內(nèi)不使用,請?jiān)谑盏皆噭┖泻螅瑢⒚總€(gè)組件分別存放在上表中指示的溫度下。
4. 新打開的ELISA酶標(biāo)板可能含有水霧樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生任何影響。未用完的板條應(yīng)立即放回裝有干燥劑的鋁箔袋中,重新密封并在-20℃下存儲(chǔ)。
5. 不同批次號(hào)、不同廠家之間的組分不要混用;否則,可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
6. 勤換吸頭,避免各組分之間的交叉污染。
7. 溶解含有蛋白質(zhì)溶液時(shí),應(yīng)始終避免起泡。
8. 不得重復(fù)使用稀釋后的工作液。
9. 為了得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,在孵育過程中,必須確保封板膜將酶標(biāo)板密封。
10. 在使用自動(dòng)洗板機(jī)時(shí),添加清洗緩沖液后,在清洗步驟之間添加30秒的浸泡時(shí)間可提高分析精度。
11. 底物溶液保存過程中應(yīng)為無色,加入到酶標(biāo)板中之后底物溶液應(yīng)從無色變?yōu)闈u變藍(lán)色。
12. 終止液應(yīng)按照與加底物溶液(TMB)相同的順序添加到酶標(biāo)板中。添加終止液后,孔中溶液的顏色將從藍(lán)色變?yōu)辄S色。綠色的孔表明終止液未與底物溶液充分混合,應(yīng)輕拍孔板使其混勻。
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可能原因 解決措施是
1,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確。 確保標(biāo)準(zhǔn)品按照推薦方法溶解和稀釋。
2,移液不準(zhǔn)確。 定期校準(zhǔn)移液器并檢查槍頭密封性。
3,反應(yīng)液蒸發(fā)。 用封板膜密封酶標(biāo)板。
4,洗板不徹底。 足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5,孔底有異物。 讀數(shù)前清潔板底。
可能原因 解決措施是
1,試劑反應(yīng)不充分 確保孵育時(shí)間并按推薦溫度孵育
2,試劑體積添加不足 檢查移液器并嚴(yán)格按照操作步驟操作
3,稀釋不正確 檢查試劑稀釋步驟
4,酶結(jié)合物失活 混合酶結(jié)合物和底物,通過顯色反應(yīng)檢查
可能原因 解決措施是
1,酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 檢查儀器波長
2,沒加終止液 加入適量終止液
3,讀板時(shí)等待時(shí)間太長 及時(shí)讀板
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