該試劑盒采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法原理。酶標板預包被親和純化的抗小鼠IFN-β的抗體。將含有小鼠IFN-β 的樣品或標準品加入到酶標板中,與包被抗體反應。再加入生物素標記的檢測抗體,并與酶標板上捕獲的小鼠IFN-β結(jié)合。接著,加入鏈霉親和素-辣根過氧化物酶(SA-HRP)以形成固相抗體-小鼠IFN-β-生物素標記抗體-SA-HRP的夾心復合物。然后,將TMB溶液加入孔中并進行孵育,酶促反應產(chǎn)生藍色物質(zhì),加入終止液后,變成黃色。在450nm 波長下測定吸光值。后通過建立標準曲線,根據(jù)OD值來計算樣品中小鼠IFN-β的濃度。
酶標儀(能測450nm處的吸光度)
多通道移液器或自動洗板機
恒溫箱、低溫離心機
可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
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可能原因 解決措施是
1,酶標儀設(shè)置不正確 檢查儀器波長
2,沒加終止液 加入適量終止液
3,讀板時等待時間太長 及時讀板
可能原因 解決措施是
1,標準品稀釋不正確。 確保標準品按照推薦方法溶解和稀釋。
2,移液不準確。 定期校準移液器并檢查槍頭密封性。
3,反應液蒸發(fā)。 用封板膜密封酶標板。
4,洗板不徹底。 足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5,孔底有異物。 讀數(shù)前清潔板底。
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