本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,待測抗原(標(biāo)準(zhǔn)品或樣本)中的嘔吐毒素和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭嘔吐毒素抗體,加入酶標(biāo)記物反應(yīng)后,洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì),然后用TMB底物顯色,酶促反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后,變成黃色。在450nm 波長下測定吸光值,樣本吸光值與其所含殘留物嘔吐毒素的含量成負(fù)相關(guān)。后通過建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,將樣本吸光值與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較可得出相應(yīng)殘留物嘔吐毒素的含量。
儀器:酶標(biāo)儀(能測 450nm 處的吸光度) 、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀/氮?dú)獯蹈裳b置、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g )、多通道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
試劑:甲醇、正己烷、濾紙
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可能原因 解決措施是
1,酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 檢查儀器波長
2,沒加終止液 加入適量終止液
3,讀板時(shí)等待時(shí)間太長 及時(shí)讀板
可能原因 解決措施是
1,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋不正確。 確保標(biāo)準(zhǔn)品按照推薦方法溶解和稀釋。
2,移液不準(zhǔn)確。 定期校準(zhǔn)移液器并檢查槍頭密封性。
3,反應(yīng)液蒸發(fā)。 用封板膜密封酶標(biāo)板。
4,洗板不徹底。 足夠的洗滌次數(shù)和加入足量洗滌液。
5,孔底有異物。 讀數(shù)前清潔板底。
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