檸檬酸合酶 (CS) 廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞的線粒體基質中，是三羧酸循環個限速酶，是三羧酸循環主要調控位點之一。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本中CS的活性，其原理是CS可以催化乙酰CoA和草酰乙酸產生檸檬酰輔酶A，進一步水解產生檸檬酸；該反應促使無色的DTNB轉變成黃色的TNB，TNB在412nm處有特征吸光值，通過檢測412nm處光吸收增加速率可以計算得到檸檬酸合酶的活性。
酶標儀或可見光分光光度計（能測412nm處的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
低溫離心機、水浴鍋、制冰機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液體積和洗滌次數；
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜，可以調整電極和加樣；
4、封閉物用量不足，可以提高封閉物濃度，孵育時保證封閉液完全浸沒轉印膜；
5、封閉物使用不當，比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉；
6、封閉時間不夠，一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜；
7、抗體非特異性結合，可以降低抗體濃度，減少孵育時間；
8、一抗稀釋度不適宜，可以對抗體進行滴度測試，選擇適宜的抗體稀釋度；
9、一抗孵育的溫度偏高，建議4℃結合過夜；
10、抗體濃度過高或洗滌不夠，建議降低抗體濃度，增加洗滌次數和時間；
11、化學顯色底物過多，建議按說明書加入適量的顯色底物。
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