ICDHc(EC 1.1.1.42)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化異檸檬酸脫氫脫羧生成 α-酮戊二酸,同時還原NADP+生成NADPH。ICDHc是細胞質(zhì)中除了磷酸戊糖途徑外又一種NADPH重要來源,在逆境中該酶活性通常會發(fā)生顯著變化。本試劑盒提供了一種簡單、方便、快速的ICDHc活性檢測方法,其原理是ICDHc催化NADP+還原成NADPH, NADPH在340nm處有特征吸收峰,在340nm下測定NADPH增加速率可計算獲得ICDHc的活性。
酶標儀或分光光度計(能測340nm處的吸光度)
96孔UV板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
水浴鍋、制冰機,低溫離心機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
1. 實驗過程中請穿戴實驗服、口罩和乳膠手套。請按照生物實驗室的國家安全規(guī)定進行實驗,尤其是在檢測血樣或其他體液時。
2. 本試劑盒僅用于實驗室科學研究,如果本試劑盒用于臨床診斷或任何其他用途,我們將不對任何后果負責。
3. 本試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,并請嚴格按照說明書進行存儲。
4. 不同批次號、不同廠家之間的組分不要混用;否則,可能導(dǎo)致結(jié)果異常。
5. 勤換吸頭,避免各組分之間的交叉污染。
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答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應(yīng)位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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