哺乳動物血液中的葡萄糖稱為血糖,血糖是糖在體內(nèi)的運輸形式。血糖濃度受神經(jīng)系統(tǒng)和激素的調(diào)節(jié)而保持相對穩(wěn)定,調(diào)節(jié)失衡時出現(xiàn)高血糖和低血糖。糖尿病、顱內(nèi)壓增加和脫水癥等均可引起高血糖;飯后精神緊張會引起生理性高血糖。胰島 β 細(xì)胞增生,胰島 β 細(xì)胞瘤,垂體、腎上腺皮質(zhì)和甲狀腺功能減退以及嚴(yán)重肝病患者均會引起低血糖;饑餓和劇烈運動可引起暫時的低血糖。血糖水平是許多代謝疾病的關(guān)鍵診斷參數(shù),因此血糖的檢測在疾病研究和藥物開發(fā)過程中非常重要。本試劑盒可檢測血液樣本中葡萄糖含量,原理是葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生過氧化氫;過氧化物酶催化過氧化氫氧化 4-氨基安替比林和酚縮合成紅色醌類化合物,其大吸收峰在 505nm,在一定的濃度范圍內(nèi)葡萄糖含量與505nm吸光度成線性關(guān)系,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣品中葡萄糖的含量。
酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(能測505nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
恒溫箱、低溫離心機(jī)
去離子水
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強(qiáng),建議使用特異性強(qiáng)的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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