糖原是由葡萄糖構成的高分子多糖,是糖主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原和葡萄糖。本試劑盒可檢測動物組織、細菌和細胞樣本中糖原含量,其原理利用強堿性提取液提取糖原,在強酸性條件下與蒽酮顯色劑形成在620nm處有特征吸收峰的藍色化合物,在一定的濃度范圍內,糖原含量與620nm吸光度成線性關系,根據標準曲線,即可計算出樣品中糖原的含量。
酶標儀或可見分光光度計(能測620nm處的吸光度)
水浴鍋、低溫離心機
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
去離子水,濃硫酸
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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