海藻糖廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中。由于海藻糖具有獨特的不同于其他碳水化合物的生物學特性,能在干旱、高溫、脫水、冷凍、高滲透壓及毒性物質等惡劣環境下保護生物體細胞蛋白質、脂肪、糖類、核酸等組分不受損害。本試劑盒檢測原理為蒽酮比色法,具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優點。
酶標儀或可見分光光度計(能測620nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿,可調節式移液槍及槍頭
制冰機,離心機,水浴鍋或金屬浴
去離子水,濃硫酸
勻漿器
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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