木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中，酸性木聚糖酶（Acidic Xylanase，ACX）一般分離自耐酸的真菌，細(xì)菌及部分霉菌。本試劑盒可檢測(cè)各種生物樣本中ACX活性，其原理是 ACX在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在540nm處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率，可計(jì)算ACX活力。
酶標(biāo)儀或可見分光光度計(jì)（能測(cè)540nm處的吸光度）以及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿，可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
低溫離心機(jī)，制冰機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn)，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息，通過去修飾確定蛋白實(shí)際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時(shí)在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強(qiáng)，建議使用特異性強(qiáng)的抗體；
5、抗體孵育時(shí)間過久，建議減少抗體孵育時(shí)間；
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng)，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強(qiáng)度；
8、底物顯色與曝光時(shí)間過長，建議縮短顯色及曝光的時(shí)間。
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試劑盒（微量法）895F0DE5284D4A389700E89B70FA9B44.png)
