纖維素是由β-D-葡萄糖單元以β-1,4-糖苷鍵連接而成的直鏈多聚體,通常與半纖維素、果膠和木質(zhì)素結(jié)合在一起,是植物細胞壁的主要結(jié)構(gòu)成分。纖維素是一種重要的膳食纖維,是自然界中分布廣、含量多的一種多糖。以纖維素為原料的產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于食品、造紙、塑料、炸藥、電工及科研器材等領(lǐng)域。本試劑盒提供了一種簡單易用的比色法,用于分析生物樣品中纖維素含量。其原理是纖維素在酸性條件下加熱能分解成β-D-葡萄糖。β-葡萄糖在強酸作用下,可脫水生成β-糠醛類化合物,利用與蒽酮顯色劑測定纖維素含量。
酶標(biāo)儀或可見分光光度計(能測620nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿,可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水,濃硫酸,80%乙醇,丙酮
制冰機,離心機,水浴鍋
勻漿器
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現(xiàn)多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學(xué)分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng),建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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