試劑盒（微量法）FDF4C2C2F8D94AB3AEBCA5B1E1FB62F9.png)
乙酰-β-D -葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.52，N-acetyl-β-D-glucosidase，NAG）廣泛存在于各種組織、體液和細(xì)胞中，是溶酶體中的一種酸性水解酶，以前列腺和腎近曲小管細(xì)胞內(nèi)含量高。NAG活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)，測(cè)定NAG活性可用于腎小管間質(zhì)性腎炎、尿路感染、糖尿病腎病綜合癥、高血壓腎病、腎移植后的 排異反應(yīng)和腎病綜合癥的早期診斷。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法，用于分析各種生物樣品中NAG的活性。其原理是NAG分解N-β-乙酰氨基葡萄糖苷生成對(duì)-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過(guò)測(cè)定400nm下吸光度升高速率來(lái)計(jì)算NAG活性。
酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(jì)（能測(cè)400nm處的吸光度）及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
離心機(jī)、制冰機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
更新中...
答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個(gè)修飾位點(diǎn)，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻(xiàn)或進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點(diǎn)信息，通過(guò)去修飾確定蛋白實(shí)際大小；
2、樣本處理過(guò)程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時(shí)在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強(qiáng)，建議使用特異性強(qiáng)的抗體；
5、抗體孵育時(shí)間過(guò)久，建議減少抗體孵育時(shí)間；
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng)，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過(guò)程及強(qiáng)度；
8、底物顯色與曝光時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，建議縮短顯色及曝光的時(shí)間。
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