過氧化氫酶(Catalase, CAT, EC 1.11.1.6)是一種常見的抗氧化酶,可催化過氧化氫(H2O2)分解為水和氧,普遍存在于含有細胞色素系統的好氧細胞中。過氧化氫對細胞是高度有害的,其積累將導致細胞靶標(例如DNA,蛋白質和脂質)的氧化,從而導致誘變和細胞死亡。通過使用過氧化氫酶從細胞中去除過氧化氫(H2O2),可以防止細胞的氧化損傷。過氧化氫酶在氧化應激相關疾病中的作用已被廣泛研究。過氧化氫酶還表現出過氧化物酶活性,其中低分子量醇可用作電子供體。脂肪醇是過氧化氫酶的特異性底物,然而,具有過氧化活性的其它酶不利用這些底物。本試劑盒提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品中過氧化氫酶活性。原理是利用過氧化氫酶的過氧化物酶功能來測定過氧化氫酶的活性。在合適濃度的H2O2存在的條件下,過氧化氫酶與甲醇反應,產生甲醛,生成的甲醛可以與顯色物反應,產物可以在540nm處測量吸光度,樣本中的過氧化氫酶活性與OD值成正比。
酶標儀或可見分光光度計(能測540 nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
離心機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠凝的不均勻或聚合不好,建議灌膠前將溶液充分混勻;
2、某些樣品鹽濃度較高,建議除鹽或將樣品鹽濃度調成一致;
3、緩沖液陳舊,成分改變,可以重配;
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走;
5、電泳時溫度過高,可以降低電流或電壓;
6、樣品中含有不溶性顆粒,建議樣品充分攪拌混勻。
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