過氧化氫(H2O2)是生物體內常見的活性氧分子,是一種活性氧代謝的副產物,主要由超氧化物歧化酶(SOD)和黃嘌呤氧化酶(XO)等催化產生,由過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)等催化降解。過氧化氫不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細胞內核酸, 蛋白質等生物大分子,使細胞膜遭受損害,從而加速細胞的衰老和解體;另一方面,H2O2也是許多氧化應急反應中的關鍵調節因子。H2O2可以激活 NF-κB 等因子,這些H2O2相關的信號途徑和哮喘、炎癥性關節炎、動脈硬化以及神經退行性疾病等許多疾病相關。H2O2也和細胞凋亡、細胞增殖等密切相關。本試劑盒提供了一種簡單易用的方法,用于測量各種生物樣本中H2O2含量。原理是利用H2O2氧化二價鐵離子產生三價鐵離子,然后和 xylenol orange(二甲酚橙)在特定的溶液中形成紫色的產物,在580nm 的吸光度與H2O2濃度成正比,從而測定H2O2濃度。
酶標儀或可見分光光度計(能測 580nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
10kDa的超濾管(用來去除蛋白)
更新中...
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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