尿酸(UA)是鳥類和爬行類動物的主要代謝產物,正常人體尿液中產物主要為尿素,含少量尿酸。此外,UA還是重要的抗氧化劑,能清除超氧化物,羥自由基等。體內UA生成量和排泄量不平衡會導致多種疾病的發生。例如,血中UA升高會引起痛風、腎功能損害和動脈硬化,相反UA降低會引起惡性貧血,在臨床診斷上具有重要的意義。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法檢測生物樣本如動物組織、血清(漿)、尿液等樣本中尿酸(UA)的含量水平。其原理是尿酸酶能催化尿酸(UA)生成尿囊素,CO2及H2O2,H2O2 氧化亞鐵氰化鉀中的Fe2+生成Fe3+ ,Fe3+進一步與酚和4-氨基安替比林縮合生成紅色醌類化合物,在505nm下有特征吸收峰,測定反應體系505nm的吸收值,可計算尿酸的含量。
酶標儀或可見分光光度計(能檢測505nm)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、低溫離心機、制冰機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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