超氧陰離子(O2-)是通過(guò)將電子加到氧上而產(chǎn)生的一種短暫的自由基。它是由紫外線、香煙煙霧,環(huán)境污染物和γ輻射等環(huán)境因素作用形成的,或者是由黃嘌呤氧化酶或 NADPH氧化酶等氧化酶衍生而來(lái)的。O2-一旦形成,就會(huì)攻擊細(xì)胞成分并破壞脂質(zhì),蛋白質(zhì)和DNA。這會(huì)引發(fā)多種疾病,包括癌癥,動(dòng)脈粥樣硬化,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,糖尿病,肝損害和中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。清除超氧陰離子自由基的研究越來(lái)越受到重視。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法,用于檢測(cè)各種生物樣本超氧陰離子清除能力。其原理是黃嘌呤氧化酶(XO)催化反應(yīng)提供了超氧陰離子(O2-)。O2-與WST-8染料反應(yīng)形成水溶性的有色甲臜產(chǎn)物,可以很容易地進(jìn)行比色定量。樣品清除了O2-,因此用于顯色反應(yīng)的O2-較少。通過(guò)比色法在OD450nm下測(cè)量樣品的這種清除能力。
酶標(biāo)儀或可見(jiàn)分光光度計(jì)(能測(cè)450nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、移液槍及槍頭
恒溫培養(yǎng)箱、制冰機(jī)、低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
更新中...
答:可能的原因有:
1、膠濃度不對(duì),不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調(diào)整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長(zhǎng)孵育時(shí)間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進(jìn)行混合,如果不顯色則說(shuō)明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關(guān)文獻(xiàn)確定;
5、標(biāo)本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照比對(duì)結(jié)果,增加標(biāo)本上樣量。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案:鄂ICP備17001029號(hào)-1 技術(shù)支持:武漢微盟