果糖是一種為常見的己酮糖,是葡萄糖的同分異構體,以游離狀態大量存在于水果的漿汁和蜂蜜中,能與 葡萄糖結合生成蔗糖。果糖是甜的單糖,廣泛應用于食品、醫藥、保健品生產中。本試劑盒可檢測各種生物樣本中果糖含量,其原理是在酸性條件下果糖與間苯二酚反應,生成有色物質,在480nm下有特征吸收峰。在一定的濃度范圍內,果糖含量與480nm吸光度成線性關系,測480nm處的吸光值,即可計算樣品果糖含量。
酶標儀或可見分光光度計(能測480nm處的吸光度)以及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
低溫離心機
去離子水
研缽或勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多個修飾位點,本身可以呈現多條帶,建議查閱文獻或進行生物信息學分析,獲得蛋白序列的修飾位點信息,通過去修飾確定蛋白實際大小;
2、樣本處理過程中目的蛋白發生降解,建議加入蛋白酶抑制劑;樣本處理時在冰上操作;
3、雜蛋白多,建議處理目的蛋白;
4、抗體特異性不強,建議使用特異性強的抗體;
5、抗體孵育時間過久,建議減少抗體孵育時間;
6、二抗與抗原有交叉反應,建議選擇合適的封閉物;
7、二聚體或多聚體存在,建議增加蛋白質變性過程及強度;
8、底物顯色與曝光時間過長,建議縮短顯色及曝光的時間。
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