線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ（EC 1.6.5.3）又稱NADH-CoQ還原酶或NADH脫氫酶，廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體內(nèi)膜中大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ，同時可使O2還原生成O2-，是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2-的主要部位。測定該酶活性，不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈（ETC）狀態(tài)，而且可以反映活性氧（ROS）生成狀態(tài)。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法，用于檢測生物體內(nèi)線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性，其原理是線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ(簡稱復(fù)合體Ⅰ) 能夠催化NADH脫氫生成NAD+，在340nm下測定NADH的氧化速率計算出該酶活性的大小。
酶標(biāo)儀或紫外分光光度計（能測340nm處的吸光度）及恒溫箱
96孔UV微孔板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
更新中...
答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多個修飾位點，本身可以呈現(xiàn)多條帶，建議查閱文獻或進行生物信息學(xué)分析，獲得蛋白序列的修飾位點信息，通過去修飾確定蛋白實際大小；
2、樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解,建議加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作；
3、雜蛋白多，建議處理目的蛋白；
4、抗體特異性不強，建議使用特異性強的抗體；
5、抗體孵育時間過久，建議減少抗體孵育時間；
6、二抗與抗原有交叉反應(yīng)，建議選擇合適的封閉物；
7、二聚體或多聚體存在，建議增加蛋白質(zhì)變性過程及強度；
8、底物顯色與曝光時間過長，建議縮短顯色及曝光的時間。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案：鄂ICP備17001029號-1 技術(shù)支持：武漢微盟
