賴氨酸是人體必需氨基酸之一,能促進人體發育、增強免疫功能,并有提高中樞神經組織功能的作用。賴氨酸為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低,且在加工過程中易被破壞而缺乏,故稱為限制性氨基酸。本試劑盒提供了一種簡單的檢測方法,可檢測各種生物樣本中賴氨酸含量,其原理是蛋白質中的賴氨酸具有一個游離的ε-NH2,它與茚三酮試劑反應生成藍紫色物質,在570nm有特征吸收峰;通過測定570nm吸光度, 來計算賴氨酸含量。
酶標儀或可見分光光度計(能測570nm處的吸光度)及水浴鍋
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
低溫離心機
去離子水、乙醇
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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