丙酮酸脫氫酶(PDH;EC 1.2.4.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,分布在線粒體基質(zhì)中,是由三個(gè)酶組合的復(fù)合體,負(fù)責(zé)催化丙酮酸脫羧,生成乙酰輔酶A的不可逆反應(yīng)。PDH是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫羧生成羥乙基-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來。本試劑盒提供了一種簡單、方便、快速的PDH活性檢測方法,其原理是PDH催化丙酮酸脫氫,同時(shí)還原2,6-二氯酚靛酚(2,6-DCPIP),從而導(dǎo)致605nm光吸收的減少。通過檢測605nm吸光值的下降既可計(jì)算PDH活性。
酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)(能測605nm處的吸光度)
96孔板或微量比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
水浴鍋、制冰機(jī),低溫離心機(jī)
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
更新中...
可能原因 解決措施是
1,酶標(biāo)儀設(shè)置不正確 檢查儀器波長
2,沒加終止液 加入適量終止液
3,讀板時(shí)等待時(shí)間太長 及時(shí)讀板
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