游離脂肪酸 (FFA ),也稱為非酯化脂肪酸,既是脂肪水解的產物,又是脂肪合成的底物,在與白蛋白結合的血漿中循環。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內分泌功能有關,FFA的濃度會因為糖尿病、重癥肝障礙、甲狀腺功能亢進等疾病而上升。本試劑盒可檢測生物體內游離脂肪酸含量,其原理是FFA與銅離子結合形成脂肪酸銅鹽,并溶于氯仿;利用銅試劑法測定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。可以檢測血清(漿)、動植物組織、細胞、細菌等樣本。
酶標儀或可見分光光度計(能測550nm處的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
恒溫箱、制冰機、低溫離心機
玻璃瓶(用于配制提取液)
勻漿器(如果是組織樣本)
正庚烷、無水甲醇、氯仿(三氯甲烷)
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答:可能的原因有:
1、膠濃度不對,不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差,可以調整濃度;
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度,延長孵育時間;
3、酶失活,建議直接將酶和底物進行混合,如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物;
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體,建議查詢相關文獻確定;
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建議設置陽性對照比對結果,增加標本上樣量。
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