ATP-檸檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACL;EC4.1.3.8)是催化檸檬酸生成乙酰輔酶A的關鍵胞質酶,其催化產生的乙酰輔酶A是合成脂肪酸與膽固醇等脂類物質的主要原料。可用于脂肪酸合成和碳鏈延長、黃酮類物質合成、氨基酸合成等,并可參與相關重要蛋白的修飾作用,是體內能源物質代謝的樞紐性物質。試劑盒提供了一種簡單的比色法來檢測生物樣本中ACL活性,其原理是ACL 在ATP和輔酶 A 存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰輔酶 A、草酰乙酸、ADP及無機磷。通過測定無機磷增加速率來確定ACL活性。
酶標儀或分光光度計(能測660nm處的吸光度)及恒溫箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可調節式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
更新中...
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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