試劑盒（微量法）C2583F91F81E4478926E402EC2F90F50.png)
高密度脂蛋白為血清蛋白之一，主要由肝臟合成，運(yùn)載周?chē)M織中的膽固醇，再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過(guò)膽汁從腸道排出，是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白，是冠心病的保護(hù)因子，俗稱(chēng)“血管清道夫”，對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。本試劑盒可檢測(cè)生物體內(nèi)HDL-C含量。其原理是：用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇，利用膽固醇酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC；進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-膽甾烯酮和 H2O2；再利用過(guò)氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林和酚，生成紅色醌類(lèi)化合物；在500 nm有特征吸收峰。
酶標(biāo)儀或可見(jiàn)分光光度計(jì)（能測(cè)500nm處的吸光度）
恒溫箱、制冰機(jī)、低溫離心機(jī)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
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答：可能的原因有：
1、膠濃度不對(duì)，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調(diào)整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長(zhǎng)孵育時(shí)間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進(jìn)行混合，如果不顯色則說(shuō)明酶失活了。選擇在有效期內(nèi)、有活性的酶聯(lián)物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢(xún)相關(guān)文獻(xiàn)確定；
5、標(biāo)本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照比對(duì)結(jié)果，增加標(biāo)本上樣量。
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