己糖激酶(HK,EC 2.7.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是葡萄糖分解過程中的個關鍵酶,催化葡萄糖轉化為 6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。本試劑盒可檢測各種生物樣本中己糖激酶(HK)活性,其原理是HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,生成的NADPH將WST-8還原生成橙黃色的formazan(甲臜),在450nm左右檢測有大吸收峰。通過檢測450nm處光吸收增加速率來計算該酶活性。
酶標儀或可見分光光度計(能測450nm處的吸光度)及恒溫培養箱
96孔板或微量玻璃比色皿、移液槍及槍頭
去離子水
勻漿器(如果是組織樣本)
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答:可能的原因有:
1、膠凝的不均勻或聚合不好,建議灌膠前將溶液充分混勻;
2、某些樣品鹽濃度較高,建議除鹽或將樣品鹽濃度調成一致;
3、緩沖液陳舊,成分改變,可以重配;
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走;
5、電泳時溫度過高,可以降低電流或電壓;
6、樣品中含有不溶性顆粒,建議樣品充分攪拌混勻。
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