肉桂酸-4-羥化酶（C4H）又稱反式肉桂酸-4-單氧化酶，是催化桂皮酸形成咖啡豆、香豆酸的酶。C4H多存在于高等植物、酵母、菌類中，屬于細胞木質(zhì)素合成途徑中間的關鍵酶。該酶催化肉桂酸羥化作用產(chǎn)生4-香豆酸鹽，是苯丙烷途徑中繼L-苯丙氨酸解氨酶之后的第二個關鍵酶。本試劑盒提供了一種簡單、方便、快速的C4H活性檢測方法，其原理是C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸鹽和NADPH，NADPH在340nm處有特征吸收峰，在340nm下測定NADPH生成速率，即可反映C4H活性。
酶標儀或紫外分光光度計（能測340nm處的吸光度）及恒溫箱
96孔UV微孔板或微量石英比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
制冰機、低溫離心機
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）
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答：如果能夠排除下面的幾個問題，那么問題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強，將底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定，失活；
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置；
4、一抗選擇不當；
5、二抗失活。
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