亞鐵氧化酶（Hsphasetin，HP）作為銅藍(lán)蛋白的同系物,是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。HP催化亞鐵離子（Fe2+）氧化為三價(jià)鐵離子（Fe3+），在介導(dǎo)鐵的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)中有重要作用。本試劑盒提供了一種簡(jiǎn)便的比色測(cè)定法，用于測(cè)定樣本中的HP活性。其原理是以一定濃度的 Fe2+為底物，在HP的催化作用下Fe2+被氧化為Fe3+，Fe2+可與菲咯嗪形成有色復(fù)合物，在562nm處有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定Fe2+的減少速率可測(cè)得亞鐵氧化酶的活性。
酶標(biāo)儀或可見(jiàn)分光光度計(jì)（能測(cè) 562nm處的吸光度）
96孔板或微量鍋、離心機(jī)、制冰機(jī)
去離子水
勻漿器（如果是組織樣本）玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
恒溫箱或水浴
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答：如果能夠排除下面的幾個(gè)問(wèn)題，那么問(wèn)題多半出現(xiàn)在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強(qiáng)，將底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不穩(wěn)定，失活；
3、ECL底物沒(méi)覆蓋到相應(yīng)位置；
4、一抗選擇不當(dāng)；
5、二抗失活。
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