乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。乳酸實(shí)際上存在兩種光學(xué)異構(gòu)體:D-乳酸和L-乳酸。L-乳酸在人類和哺乳動(dòng)物中含量更豐富,其在血液中的濃度是D-乳酸的100倍。D-乳酸主要由某些細(xì)菌(如乳酸桿菌、大腸桿菌)發(fā)酵產(chǎn)生。人體對(duì) D-乳酸的代謝能力有限,正常情況下,人體內(nèi)的 D-乳酸含量甚微,D-乳酸在體內(nèi)積累可引發(fā)D-乳酸酸中毒,表現(xiàn)為神經(jīng)功能障礙和腦病。本試劑盒提供了一種檢測(cè)生物樣品中D-乳酸的便捷方法。在該試劑盒中,D-乳酸鹽在D-乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時(shí)使NAD+還原生成NADH,可與四唑鹽WST-8染料反應(yīng),形成與樣本中的D-乳酸鹽濃度成正比例的有色產(chǎn)物,其在450nm處有大吸收峰,據(jù)此可計(jì)算D-乳酸含量。由于D-乳酸脫氫酶的特異性,L-乳酸不會(huì)造成干擾。
酶標(biāo)儀或可見光分光光度計(jì)(能測(cè)450nm處的吸光度)
恒溫箱、制冰機(jī)、低溫離心機(jī)
96孔板或微量玻璃比色皿、可調(diào)節(jié)式移液槍及槍頭
去離子水
10kDa MW 超濾管、勻漿器(如果是組織樣本)
更新中...
答:可能的原因包括培養(yǎng)基質(zhì)量、血清質(zhì)量、溫度、pH值、氣體比例等。
解決方法有:
1. 使用高質(zhì)量的培養(yǎng)基和血清,確保其無菌、無支原體污染,并保證在保質(zhì)期內(nèi)使用;
2. 培養(yǎng)箱溫度和氣體比例要保持穩(wěn)定,定期校準(zhǔn);
3. 每天檢查并記錄細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境參數(shù),如溫度、pH值、氣體比例等,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題;
4. 定期更換培養(yǎng)基,保持細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)充足;
5. 對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的細(xì)胞株,可以嘗試進(jìn)行克隆篩選或更換培養(yǎng)基。
Copyright ?湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部備案:鄂ICP備17001029號(hào)-1 技術(shù)支持:武漢微盟