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Western Blot(WB)實驗中膠片是一片空白,是怎么回事?
答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
甘氨酸(Glycine,縮寫 Gly)又名氨基乙酸,屬于非必需氨基酸,它參與嘌呤、絲氨 酸和卟啉的合成。甘氨酸門控通道介導鈣離子通過細胞膜內流。它還作為谷氨酸與 NMDA (N-甲基-D-天冬氨酸)受體結合的競爭性激動劑。在癌細胞中,由于對氨基酸的需求增 加,甘氨酸的合成可能會增加。甘氨酸可用于多肽合成、氨基酸保護單體、組織培養基的制備,銅、金和銀的檢驗。并且甘氨酸為具有氨基和羧基的兩性離子,有很強的緩沖性,常用作配制緩沖液。用于蛋白變性聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗(SDS-PAGE)中的緩沖試劑等。
常用于 PAGE 電泳或 Western 轉膜實驗中緩沖液的配置
根據實際需要參閱相關文獻配制和使用
1、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
2、本產品僅限于專業人員的科學研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內。
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答:如果能夠排除下面的幾個問題,那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強,將底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不穩定,失活;
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置;
4、一抗選擇不當;
5、二抗失活。
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