本產品可顯影蛋白Marker(13-154kDa)為預染可曝光蛋白marker，由8種高純度的非預染重組蛋白和4種預染重組蛋白組成，指示的蛋白質分子量大小為13-154kDa（13、22、28、38、50、62、70、78、113、140、154kDa），其中70kDa為玫紅色預染條帶，13、28、140kDa均為藍色預染條帶，方便動態觀察蛋白質電泳狀態或判斷蛋白質轉膜效果。8條非預染重組蛋白可以結合幾乎所有類型抗體（雞抗體除外），可與目的蛋白質同時結合抗體并經ECL或其他方式顯色。
產品編號 | 名稱 | 規格 |
PMK0829- 1 | 可顯影蛋白Marker | 250ul |
PMK0829-2 | 緩沖液 | 1ml |
1.本產品為即用型，無需加入還原劑或加熱，取-20℃保存的可顯影蛋白Marker于室溫下解凍后輕輕充分混勻后即可使用；
2.由于市面上抗體效價有差異，建議實驗室在初次使用本產品時可以根據自身的實驗條件和實驗習慣通過預實驗確定合適的稀釋比例，這樣既可以節約成本，同時也可獲得效果更佳的實驗圖片；（建議僅供參考：對于使用一抗為鼠源抗體建議取本產品5ul與實驗樣品同時進行蛋白電泳；對于使用一抗為兔源抗體建議將本產品利用提供的緩沖液稀釋4倍后取5ul與實驗樣品同時進行蛋白電泳）
3.可顯影蛋白Marker使用完后及時保存于-20℃（建議分裝保存使用）。
1.可顯影蛋白Marker不能100℃加熱或者煮沸，否則會導致蛋白條帶發生降解或失去效果；
2.若可顯影蛋白Marker顯色條帶較粗時，可以用緩沖液適當稀釋后使用，稀釋后Marker中4個預染蛋白條帶顏色會相應變弱，屬于正常現象；
3.由于市面上抗體特異性參差不齊，所以遇到預染條帶被顯影屬于正常現象，根據位置大小可以明顯區分；
4.為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5.本產品僅限于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內。
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答：如果能夠排除下面的幾個問題，那么問題多半出現在一抗和抗原制備上。
1、二抗的HRP 活性太強，將底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不穩定，失活；
3、ECL底物沒覆蓋到相應位置；
4、一抗選擇不當；
5、二抗失活。
答：可能的原因有：
1、膜沒有完全均勻濕透,建議 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液體積和洗滌次數；
3、電極不平衡或者加樣位置偏斜，可以調整電極和加樣；
4、封閉物用量不足，可以提高封閉物濃度，孵育時保證封閉液完全浸沒轉印膜；
5、封閉物使用不當，比如檢測生物素標記的蛋白時不可用脫脂奶粉封閉；
6、封閉時間不夠，一般情況下室溫37度封閉1小時以上或者4度封閉過夜；
7、抗體非特異性結合，可以降低抗體濃度，減少孵育時間；
8、一抗稀釋度不適宜，可以對抗體進行滴度測試，選擇適宜的抗體稀釋度；
9、一抗孵育的溫度偏高，建議4℃結合過夜；
10、抗體濃度過高或洗滌不夠，建議降低抗體濃度，增加洗滌次數和時間；
11、化學顯色底物過多，建議按說明書加入適量的顯色底物。
答：可能的原因有：
1、膠凝的不均勻或聚合不好，建議灌膠前將溶液充分混勻；
2、某些樣品鹽濃度較高，建議除鹽或將樣品鹽濃度調成一致；
3、緩沖液陳舊，成分改變,可以重配；
4、凝膠下面有氣泡,電泳前要先將氣泡趕走；
5、電泳時溫度過高，可以降低電流或電壓；
6、樣品中含有不溶性顆粒，建議樣品充分攪拌混勻。
答：可能的原因有：
1、膠濃度不對，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調整濃度；
2、抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長孵育時間；
3、酶失活，建議直接將酶和底物進行混合，如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物；
4、目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關文獻確定；
5、標本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建議設置陽性對照比對結果，增加標本上樣量。
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